疏水層析的原理

       疏水層析是根據(jù)物質的疏水性質進行分離的技術。蛋白疏水性取決于表面的氨基酸殘基帶的疏水基團多少和強弱。

       除了通過蛋白質的結構來預測蛋白的疏水性以外，我們還可根據(jù)蛋白開始鹽析沉淀的鹽濃度為基礎來評價蛋白的相對疏水性。

       圖1是用四種標準蛋白質在瓊脂糖苯基高分辨率介質上的層析圖譜應用舉例。與幾乎所有的色譜圖一樣，左側的垂直軸顯示的是UV吸收值，通過鹽濃度的變化可以實現(xiàn)四種蛋白的完全分離，如果考慮它們的三級結構，我們會發(fā)現(xiàn)疏水性弱的蛋白質會最后被洗脫下來。 

圖1.圖片來源于網(wǎng)絡

 

疏水層析的影響因素

 

產品簡介

 

產品應用

 

純化步驟

 

測試結果

填料：5mL翌圣Butyl Agarose 4FF&其它品牌對應產品樣品：發(fā)酵液上清進行SP強陽離子交換柱純化后樣品加入1.5M硫酸銨，pH3.5
樣品加載：20mL
起始緩沖液A：20mM醋酸鈉+1.5M硫酸銨 PH3.5
洗脫緩沖液B：20mM醋酸鈉 pH3.5
流速：3mL/min
 

圖2.翌圣Butyl Agarose 4FF純化峰圖

優(yōu)勢：峰較高且分辨率較高。

圖3.其它品牌純化峰圖

 

常見問題

 

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