注：如果您是想查詢核酸外切酶Ⅲ（Exonuclease III)，可點(diǎn)擊鏈接獲取產(chǎn)品應(yīng)用詳情或通過(guò)下方鏈接直接訂購(gòu)（http://jmdlpcb.com/products/detail/4846）。

核酸外切酶I（Exonuclease I）是一種對(duì)變性或單鏈脫氧核糖核酸具有高度選擇性的核酸外切酶，作用時(shí)，Exonuclease I從單鏈聚脫氧核糖核苷酸的3 羥基端開(kāi)始攻擊，隨后逐步釋放出脫氧核糖核苷5 ' -單磷酸鹽，但末端二核苷酸會(huì)保持完整，對(duì)雙鏈DNA或RNA無(wú)活性。

圖1. Exonuclease I降解單鏈DNA示意圖

1.常用于在Sanger測(cè)序或SNP分析之前去除PCR反應(yīng)中的單鏈引物（了解詳情）；

2.去除巢式PCR中的單鏈引物；

3.PCR產(chǎn)物酶法純化（了解詳情）；

4.從核酸混合物中去除含有3'羥基末端的單鏈DNA等

翌圣的Exonuclease I（Cat#14535ES）由分子酶改造平臺(tái)——ZymeEditor™重組表達(dá)而來(lái)，可高效消化單鏈DNA，嚴(yán)格質(zhì)控，無(wú)核酸外切酶（雙鏈）、核酸內(nèi)切酶、RNase殘留，酶性能穩(wěn)定，效期長(zhǎng)達(dá)2年，只需80℃處理15 min即可使酶失活，簡(jiǎn)化了您的實(shí)驗(yàn)流程，適用于各種PCR反應(yīng)后引物的去除及從核酸混合物中去除含有3'羥基末端的單鏈DNA。

20 μL反應(yīng)體系中加入終濃度為15 pmol/μL的單鏈DNA底物，分別使用不同投入量（0.63、1.25、2.5、5、10、20 U）的翌圣及品牌N*的Exonuclease I在37℃下孵育15 min，80℃熱失活15 min，聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)單鏈DNA降解情況。結(jié)果顯示翌圣的Exonuclease I消化單鏈DNA的能力與品牌N*一致。

圖2. 翌圣及品牌N*對(duì)單鏈DNA的消化能力

將500 ng底物DNA與100 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h，瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA條帶不發(fā)生變化，表明Exonuclease I無(wú)核酸內(nèi)切酶殘留。

圖3. 核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè)

將底物RNA與20 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h，瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)RNA條帶不發(fā)生變化，表明Exonuclease I無(wú)RNase殘留。

圖4. RNase殘留檢測(cè)