------無血清細胞培養(yǎng)添加物

>>>背景介紹

轉(zhuǎn)鐵蛋白又名運鐵蛋白（Transferrin，TRF、Tf），負責運載由消化管吸收的鐵和由紅細胞降解釋放的鐵。以三價鐵復合物（Tf-Fe³⁺）的形式進入骨髓中，供成熟紅細胞的生成。轉(zhuǎn)鐵蛋白主要存在于血漿中，血漿中的轉(zhuǎn)鐵蛋白供應機體絕大部分組織的鐵，而在其不能到達的部位，由這些組織自己合成的轉(zhuǎn)鐵蛋白在局部產(chǎn)生轉(zhuǎn)鐵作用。

圖1: 轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)構(gòu)

人轉(zhuǎn)鐵蛋白（Human Transferrin）主要在肝臟合成，是由位于同源N-端和C-端的兩個葉片（Lobe）組成的一種單鏈糖蛋白。人轉(zhuǎn)鐵蛋白共含678個氨基酸殘基，等電點為5.9、分子量為76kD。每分子的轉(zhuǎn)鐵蛋白能攜帶2個三價鐵離子(Fe³⁺)。轉(zhuǎn)鐵蛋白與Fe³⁺的相互作用取決于pH，pH為7.4時，轉(zhuǎn)鐵蛋白與Fe³⁺高效結(jié)合，在酸性pH下兩者分離。

>>>存在形式

>>>作用機制

轉(zhuǎn)鐵蛋白（Tf）結(jié)合鐵是通過與其受體，即Transferrin Receptor 1(TfR1)相互作用而實現(xiàn)的。TfR1 是一種表達于細胞表面的糖蛋白，由兩個同源二聚體的亞基通過二硫鍵連接而成。在細胞表面，Tf與Fe³⁺相互作用形成全鐵-Tf，并與TfR1受體結(jié)合，在細胞內(nèi)吞作用下進入核內(nèi)體。在偏酸性核內(nèi)體的環(huán)境中，F(xiàn)e³⁺與Tf分離，同時STEAP3將Fe³⁺還原為Fe²⁺，并被二價金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白1（DMT1）轉(zhuǎn)運到細胞質(zhì)中，然后釋放了Fe³⁺的Tf與TfR1組成Tf/TfR1復合物，通過胞吐作用回游到細胞表面。在細胞表面，轉(zhuǎn)帖蛋白（Tf）與受體TfR1分離，成為脫鐵-Tf，然后再與Fe³⁺重新結(jié)合參與鐵循環(huán)。整個過程完成后Tf和TfR1被循環(huán)利用，進入細胞攝取鐵的下一個周期中。

圖2: 轉(zhuǎn)鐵蛋白循環(huán)機理圖

>>>轉(zhuǎn)鐵蛋白主要功能

>>>轉(zhuǎn)鐵蛋白來源

>>>產(chǎn)品特點

安全性好：產(chǎn)品通過多層質(zhì)檢檢測，避免了病原體的污染；

毒性小：細胞毒性非常低，對后續(xù)實驗沒有影響；

性能穩(wěn)定：每批次均從同一細胞株中表達，性能差別小，蛋白純度高

操作簡單： 只需將產(chǎn)品加入培基中即可；

應用性廣：可適用于不同類型細胞的培養(yǎng)。

>>>FAQ

Q1：無血清培養(yǎng)基中應該添加提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白，還是重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白？

答：提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白具有安全性差和批間差大等缺陷，尤其是將提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白添加于用于細胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基中時，可能會將人或動物的病原體（如瘋牛病病毒，克雅氏病毒和其它未知病原體）帶入細胞中，污染細胞。重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白完全避免了病原體污染的可能性，因此無血清培養(yǎng)基中更應該添加重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白。

Q2：培養(yǎng)基中應該添加鐵飽和(Holo)轉(zhuǎn)鐵蛋白，還是脫鐵(Apo)轉(zhuǎn)鐵蛋白?

答：當培養(yǎng)基中不含鐵或鐵含量較低時，選擇添加鐵飽和(Holo)的轉(zhuǎn)鐵蛋白；當培養(yǎng)基中富含鐵時，選擇脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白。

Q3：鐵飽和(Holo)的轉(zhuǎn)鐵蛋白和脫鐵(Apo)的轉(zhuǎn)鐵蛋白，哪個效果好?

答：無法從理論上推斷出兩者的效果好壞，需要通過實驗檢測。

Q4：轉(zhuǎn)鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的濃度是多少?

答：轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度和細胞類型有關，具體的濃度與細胞狀態(tài)、細胞濃度、實驗目的有關。一般原代細胞：5-100mg/L；中國倉鼠卵巢細胞：10-50mg/L；雜交瘤和Vero細胞：5-20mg/L

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