產(chǎn)品簡介

 

生物制品生產(chǎn)中經(jīng)常會涉及到細胞培養(yǎng)或組織培養(yǎng)，在這些培養(yǎng)中胎牛血清被廣泛應(yīng)用，為細胞生長提供必須的營養(yǎng)成分，而胎牛血清中就包含了一定量的BSA（Bovine serum albumin，牛血清白蛋白）。考慮到生產(chǎn)的藥物的安全性，目前疫苗、抗體藥物、組織工程產(chǎn)品以及細胞&GCT等生物制品的生產(chǎn)過程中，逐漸使用無血清培養(yǎng)基來替代含血清培養(yǎng)基，從而減少可能由血清帶來的病毒污染等潛在危害。其中，無血清培養(yǎng)基多采用各種可以替代血清功能的生物大分子配制而成，例如牛血清白蛋白（BSA）、轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素。由此，無論使用含血清培養(yǎng)基還是無血清培養(yǎng)基，都會有BSA。雖然在生產(chǎn)中經(jīng)過純化等步驟去除了大部分的雜質(zhì)蛋白，但仍然會有微量的外源蛋白（如BSA等）存在于最終的生物制品中。

BSA作為外源蛋白進入人體后可能引起嚴(yán)重過敏反應(yīng)，從而影響生物制品的安全性。2020版《中國藥典》（三部）對各種疫苗中BSA的殘留量進行了明確規(guī)定，基本是不高于50 ng/mL或者不高于50 ng/劑。

ELISA法是一種使用簡單、靈敏度高且客觀的BSA的殘留量檢測方法。本試劑盒應(yīng)用雙抗夾心酶聯(lián)免疫檢測（ELISA）的實驗原理進行BSA殘留量的檢測，將BSA標(biāo)準(zhǔn)品（36722-B）和待測樣本加入預(yù)包被抗BSA抗體的酶標(biāo)板（36722-A），然后加入稀釋后的HRP標(biāo)記的BSA檢測抗體（36722-C），形成抗體+抗原+抗體-HRP復(fù)合物，洗板后加入TMB顯色混合液（36722-E + 36722-F）顯色。TMB在HRP酶的催化下由無色轉(zhuǎn)化成藍色并在終止液（36722-G）的作用下最終轉(zhuǎn)化成黃色。黃色的深淺與樣本中被檢測到的BSA的含量呈正相關(guān)。本試劑盒可以用于生物制品純化工藝過程的優(yōu)化、中間工藝過程的雜質(zhì)控制以及終產(chǎn)品的放行檢測。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號	36722ES96
規(guī)格	96 T
檢測范圍	1.5625~50 ng/mL
檢測方法	雙抗夾心法
檢測時長	＜3小時
靈敏度	定量限1.5625 ng/mL，檢測限≤1.0 ng/mL
回收率	75 - 125%
板內(nèi)差	<10%
板間差	<10%

 

實驗數(shù)據(jù)

 

1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

典型的參考標(biāo)準(zhǔn)曲線如下（以下標(biāo)準(zhǔn)曲線圖僅供參考，應(yīng)以同次實驗標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本含量）：

       圖1：BSA ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

 

 

標(biāo)曲（ng/mL）	OD		平均OD
50	2.627	2.711	2.669
25	1.918	2.032	1.975
12.5	1.157	1.148	1.153
6.25	0.675	0.717	0.696
3.125	0.376	0.341	0.359
1.5625	0.208	0.199	0.203
0	0.106	0.117	0.111

表1 典型標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)