產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）是專(zhuān)門(mén)針對(duì)貼壁細(xì)胞設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)的減血清培養(yǎng)基（使用時(shí)僅需添加2.0%血清）。相較常規(guī)培養(yǎng)方案，CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）+2.0%血清的培養(yǎng)方案在保持相同/略高目標(biāo)蛋白表達(dá)情況下，減少80%血清用量，大大降低完全培養(yǎng)基成本。

 

組分信息

 

組分名稱(chēng)	40145ES80
CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）	1000 mL

 

儲(chǔ)存條件

 

2~8℃，避光保存，有效期12個(gè)月。

 

使用說(shuō)明

 

一、制備完全培養(yǎng)基

CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）+2.0%血清，使用前預(yù)熱至37℃。

二、細(xì)胞復(fù)蘇與傳代

1. 在37℃水浴中快速融化凍存的細(xì)胞，待凍存管底部余下米粒大小冰塊便可取出（全程<2min）。用70%乙醇對(duì)凍存管外部消毒。
2. 將凍存管中的細(xì)胞液全部轉(zhuǎn)移至15 mL無(wú)菌離心管中，加入9mL完全培養(yǎng)基，混勻，800rpm離心5 min，棄上清。
3. 將細(xì)胞沉淀重懸在1mL完全培養(yǎng)基中，混勻，取樣計(jì)數(shù)。剩余細(xì)胞懸液全部轉(zhuǎn)移至預(yù)先加入9mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中，混勻，靜置于培養(yǎng)箱（37℃，5 - 8% CO2）中培養(yǎng)。
4. 待匯合度達(dá)到80 - 90% ，即可按如下步驟進(jìn)行傳代。
5. 從培養(yǎng)瓶中吸棄舊培養(yǎng)基，加入1mL 常溫 PBS潤(rùn)洗后吸棄。
6. 添加 1 mL的0.25%Trypsin-EDTA，室溫孵育 30-60s至細(xì)胞開(kāi)始滑落。
7. 添加 5 mL完全培養(yǎng)基終止細(xì)胞消化反應(yīng)，輕輕吹打瓶壁收集細(xì)胞。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到15 mL 無(wú)菌離心管中，800rpm 離心5 min，棄上清。
8. 將細(xì)胞沉淀重懸在1 mL完全培養(yǎng)基中，混勻成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后補(bǔ)加新鮮完全培養(yǎng)基制備指定密度的細(xì)胞懸液。

三、細(xì)胞馴化與凍存

1. 使用常規(guī)培養(yǎng)方法（DMEM+10.0%血清）凍存或培養(yǎng)的293貼壁細(xì)胞，替換至本產(chǎn)品時(shí)，建議按照如下流程進(jìn)行馴化。
2. 將細(xì)胞接種到預(yù)熱的完全培養(yǎng)基中，置于37℃，5 - 8% CO₂培養(yǎng)箱培養(yǎng)。推薦接種密度（4 - 8）×10⁴cells/cm²。
3. 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到80 - 90%時(shí)，繼續(xù)傳代細(xì)胞。
4. 經(jīng)過(guò)2 - 3次傳代后，293貼壁細(xì)胞基本均可適應(yīng)CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）完全培養(yǎng)基。
5. 選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、活率>90%的細(xì)胞，以（1 - 5）×10⁶cells/mL凍存于Serum-Free CellStore Freezing 無(wú)血清細(xì)胞凍存液（40151ES）中。

 

注意事項(xiàng)

 

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

3. 細(xì)胞應(yīng)及時(shí)傳代。如果細(xì)胞密度很高，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)下降，死亡細(xì)胞增多，細(xì)胞碎片增多，細(xì)胞聚集。

 

 

Ver.CN20240922