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        1. Cebrary? Intestinal Differentiation Medium(Human) 小腸類器官分化培養(yǎng)基

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          產(chǎn)品說(shuō)明書

          FAQ

          COA

          已發(fā)表文獻(xiàn)

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

           

          Cebrary® Intestinal Differentiation Medium(Human)小腸類器官分化培養(yǎng)基用于人小腸類器官的分化培養(yǎng),可得到成熟的人小腸類器官,含有腸上皮所有細(xì)胞類型。其中人小腸類器官的建立和維持培養(yǎng)需使用小腸類器官生長(zhǎng)培養(yǎng)基(41449ES)。

           

          分信息

           

          組分編號(hào)

          組分名稱

          41450ES60

          41450 - A

          Cebrary® Intestinal Differentiation Medium(Human)

          小腸類器官分化培養(yǎng)基

          100 mL

          41450 - B

          Cebrary® Intestinal Maturation  Medium(Human)

          小腸類器官成熟培養(yǎng)基

          100 mL

           

          儲(chǔ)存條件

           

          2 ~ 8℃避光儲(chǔ)存,有效期3

           

          使用說(shuō)明

           

          一、人源小腸原代培養(yǎng)

          方法參照41449ES步驟。

           

          二、人源小腸類器官分化誘導(dǎo)

          1. 當(dāng)80%的類器官直徑達(dá)到100 - 150 μm時(shí),可進(jìn)行類器官的分化誘導(dǎo)。
          2. 取出培養(yǎng)板,沿孔邊緣吸去培養(yǎng)基每孔加入預(yù)冷的500 μL DPBS,使用移液器吸頭劃膠使基質(zhì)膠從板底脫落,將類器官轉(zhuǎn)移至15 mL離心管。 
          3. 補(bǔ)充適量DPBS吹打混勻,使類器官?gòu)幕|(zhì)膠中洗脫出來(lái)。 4℃,300 g,離心 5 min。離心結(jié)束棄上清,保留沉淀。
          4. 補(bǔ)充適量DPBS,吸打混勻。4℃,300 g,離心 5 min;離心后棄去上清,保留沉淀。 
          5. 使用預(yù)冷的完全培養(yǎng)基將基質(zhì)膠稀釋到70%。 
          6. 向離心管中加入適量基質(zhì)膠重懸20 ± 5類器官/10 μL。 
          7. 將預(yù)熱的48孔細(xì)胞培養(yǎng)板取出按照20 μL/孔接種類器官基質(zhì)膠懸液。
          8. 37℃、CO2培養(yǎng)箱中孵育10 - 15 min。 
          9. 孵育結(jié)束后每孔加入500 μL人小腸類器官分化培養(yǎng)基。 
          10. 37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),每2 - 3天更換一次新鮮培養(yǎng)基。
          11. 6天后,棄去培養(yǎng)基,每孔加入300 μL人小腸類器官成熟培養(yǎng)基
          12. 37℃、CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),每2 - 3天更換一次新鮮培養(yǎng)基 
          13. 6天后完全成熟的人小腸類器官,多數(shù)為出芽類器官,少數(shù)為未出芽類器官,可用于后續(xù)分析。

           

           

          注意事項(xiàng)

           

          1. 本產(chǎn)品僅作科研用途

          2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

          3. 產(chǎn)品的分裝、使用等操作需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行。

           

           

          Ver.CN20250415

           

           

          400-6111-883