Hieff?exosometrackerkit(for green fluorescence)外泌體綠色熒光示蹤試劑盒
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產(chǎn)品說(shuō)明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
Exosome（外泌體）是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中；Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息，不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用，更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。
本試劑盒外泌體綠色熒光示蹤染料能將脂質(zhì)尾巴的綠色熒光染料（PKH67）結(jié)合到細(xì)胞膜脂質(zhì)區(qū)域上。該試劑盒可以在染色過(guò)程中增加染色效率，同時(shí)維持細(xì)胞活力?？捎糜谕饷隗w的標(biāo)記染色實(shí)驗(yàn)，監(jiān)測(cè)細(xì)胞吞噬作用。
產(chǎn)品組分
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編號(hào) |
組分 |
規(guī)格 |
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40781-A |
PKH67 |
20 μL（1mM） |
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40781-B |
Dilution Buffer |
200 μL |
產(chǎn)品性質(zhì)
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化學(xué)名稱（Chemical name） |
PKH67 |
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CAS號(hào)（CAS NO.） |
N/A |
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分子式（Formula） |
N/A |
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分子量（Molecular weight） |
200 |
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外觀（Appearance） |
liquid |
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激發(fā)波長(zhǎng)（Ex） |
λex 490 nm |
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發(fā)射波長(zhǎng)（Em） |
λem 502 nm |
運(yùn)輸和保存方法
- 收到產(chǎn)品后將試劑分開儲(chǔ)存，使用前請(qǐng)充分混勻。
- 冰袋運(yùn)輸，2-8℃避光保存，有效期12個(gè)月。
注意事項(xiàng)
- PKH67母液易水解，建議分裝保存，分裝后用封口膜密封保存；
- PKH67工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用,不能能提前配制，否則將影響染色效果；
- PKH67溶解液在較低溫度下會(huì)凝固而粘在管底內(nèi)，可以 37℃水浴片刻至全部融解后使用。
- 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
- 本產(chǎn)品僅作科研用途！
操作方法
1.外泌體蛋白定量：取適量外泌體進(jìn)行BCA蛋白濃度測(cè)定以確定外泌體蛋白量；
2.染料工作液制備：用Dilution buffer將PKH67儲(chǔ)存液稀釋10倍，配制濃度為100 μM的染料工作液（避光操作，工作液應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量適當(dāng)配置，現(xiàn)配現(xiàn)用）；
3.外泌體染色：
（1）在外泌體中加入染料工作液，建議加入劑量如下：
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外泌體蛋白量 |
加入染料工作液劑量 |
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10~200 ug |
50 μL |
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200~500 ug |
100 μL |
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500~1000 ug |
200 μL |
（2）加入染料工作液后將離心管蓋緊，通過(guò)渦旋振蕩器混勻1 min，再靜置孵育10min；
（3）向孵育后的外泌體-染料復(fù)合物中加入10 mL的1x PBS混勻；
（4）按照外泌體提取方法再次提取外泌體以去除多余染料；
（5）取200 μL 1×PBS重懸沉淀物，沉淀即為染色后的外泌體。
注意：過(guò)度染色會(huì)導(dǎo)致外泌體膜完整性喪失，最佳PKH67染料/外泌體用量需根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)而決定。
HB2201104
